CAR-T浸润实体瘤两步：IFN-γ和ICAM-1介导 _健康小知识

作者：癌图腾
作为肿瘤T细胞免疫疗法的现阶段的“大哥” ， CAR-T面对血液瘤的辉煌“战绩”在实体瘤这里则复制失败。尽管一些CAR-T疗法找到了一些具有高度肿瘤特异性的靶点来达到更突出的疗效，但是同时，一些在小分子或抗体疗法中已验证有效的靶点，换到CAR-T身上却没有那么简单。（CAR-T临床阶段靶点概况及未来）
以合适的抗原靶点为前提的情况下，通常关注肿瘤微环境(TME)对CAR-T疗效的影响。基于肺癌的两项研究表明， T细胞的迁移方向和速度受到肿瘤相关巨噬细胞(TAM)和细胞外基质(ECM)方向、间距和密度的调控，将其隔离在间质中，从而阻碍T细胞和肿瘤细胞之间的相互作用。
而CAR-T究竟是怎样突破TME屏障展开针对肿瘤细胞的细胞毒性杀伤作用的呢？近年来，趋化因子及其受体在在吸引CAR-T细胞和促进其与肿瘤恶性细胞接触方面的重要性获得了关注。 CANCERIMMUNOLOGYRESEARCH上的一篇研究通过比较CD20（血液瘤）和EGFR（实体瘤）CAR-T进入肿瘤细胞的活化反应，其结果提示了提高CAR-T实体瘤疗效的方向。
此次使用的CAR-T结构为包含4-1BB共刺激结构域的二代CAR-T ，和目前大部分上市和在研的CAR-T一致。
血液瘤
靶点抗原外的调控者ICAM-1
首先在小鼠模型中， CD20CAR-T与恶性B细胞接触后，胞内Ca2+浓度迅速增加是T细胞激活的最早迹象之一。随着CAR-T与肿瘤细胞相互作用增加，胞内Ca2+浓度也大幅提升。不过其体内持久性相较体外实验有明显下降。

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然而，在13个未经治疗的慢性淋巴细胞白血病(CLL)患者血液样本中，作用后能引起胞内Ca2+反应的CD20CAR-T比例从15%到50%不等，不同患者样本之间差异性明显。

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这种变异性似乎与CD20表达无关。这一结果表明，肿瘤细胞表达的其他表面蛋白决定了CD20CAR-T细胞的反应有效性。经测量患者样本的细胞间粘附分子1（ICAM-1?）水平，可观察到激活的CAR-T细胞的百分比和ICAM-1的密度之间存在明显的正相关。并且，阻断ICAM-1或其抗原LFA-1表达的结果也印证了这一结论。

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ICAM-1缺失降低了CD20CAR-T细胞的细胞毒性。这些结果表明，恶性B细胞的ICAM-1表达在CD20CAR-T细胞对其靶细胞的响应性中起着至关重要的作用。

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实体瘤
第一步IFN-γ ，第二步ICAM-1
不论是在培养的细胞簇中还是患者肿瘤切片样本中，都显示：绝大多数引起胞内Ca2+增加的CAR-T细胞倾向于优先在实体瘤外周活化，形成大量CAR-T-肿瘤细胞偶联物。极少数CAR-T细胞通过与肿瘤岛的肿瘤细胞相互作用而被激活。
那么ICAM-1表达对CAR-T活化的作用是否能在EGFR实体瘤中“复制”呢？
结论是能，但没这么简单。
实际上，在CAR-T作用前的检测发现，胰腺癌细胞和胆管癌细胞中的ICAM-1表达水平极低，相较于恶性B细胞，可谓是微乎其微。因此无法直接观察到ICAM-1水平对CAR-T活化的调控。
而在BxPC3肿瘤中， EpCAM和EGFR呈均匀分布，不具有表面聚集性，也从而表明至少在此类肿瘤中， CAR-T对实体瘤的低疗效并非由表面抗原的表达造成。
扫描分析显示，仅有CD104(整合素b4)和CD49f(整合素a6)在外围富集2-3倍。在BxPC3簇外围CD104的优先表达部分控制了EGFRCAR-T细胞与靶细胞相互作用时的初始反应。在初始的外周激活之后， EGFRCAR-T细胞逐渐迁移到肿瘤细胞区域的中心。