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图注:根据m/z值对牛膝的3种成分进行了购买和鉴定。质谱检测牛膝单体成分,B-蜕皮甾酮分子式为C30H48O3, m/z值为11.7(图1A);齐墩果酸的分子式为C27H44O7, m/z值为25.19(图1B)。
图11 牛膝有效成分分子结构图
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图12 牛膝3种单体不同配伍对治疗后关节粘连及炎症水平的影响
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图13 牛膝3种单体I组和L组差异表达代谢物的层次聚类分析
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图注:A.对差异表达代谢物进行富集分析发现,I组花生四烯酸(AA)代谢途径显著富集;B.ELISA检测大鼠血清样本中验证PGE2的表达,经治疗后PGE2表达显著降低;C.WB检测花生四烯酸代谢通路关键蛋白COX2在软骨组织中的表达情况,结果显示,经治疗后COX2表达降低;D.WB统计分析结果
图14 牛膝有效成分对花生四烯酸代谢途径影响的研究
四、牛膝有效成分产品的临床转化成果应用
牛膝醇提物是牛膝有效成分的浓缩物,纯度高,吸收快,是修复软骨病变的好材料。基于前期研究,我们课题组开展了牛膝醇提物治疗骨关节炎的系列研究,分别从分子生物学、细胞学层面实验再到动物实验和人体实验层面,证实了牛膝醇提物能显著改善骨关节炎的滑膜粘连、减轻关节液的炎症物质和促进软骨细胞修复的有效性。
近7年来,我们科开展了牛膝醇提物中药定向透药临床治疗项目(已申请院内制剂),表明了牛膝醇提物能显著减轻关节肿胀和降低关节疼痛,效果显著,在临床治疗中获得了患者一致好评。
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图15 牛膝醇提液的院内制剂包装
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图16 牛膝醇提液配合透药仪给骨关节炎患者治疗实践图
马笃军中医药治疗骨关节炎课题组团队主要成员:马笃军、彭力平、蒋顺琬、王立新、余阗、余伟吉、高坤、廖州伟、李亨、谢辉、吴克亮、李媛、赵静、钟静、刘乐诗、佘锐豪,等。课题组博士生导师1人、硕士生导师3人,由高级职称7人、中级职称4人、初级职称1人、研究生4人组成,其中博士学位4人、硕士学位7人。
项目负责人简介
马笃军:副主任医师、广州中医药大学硕士生导师、在职博士,全国青年中医药求真学者,国家自然科学基金评审专家,深圳市医学菁英人才,TMR国际期刊青年编委,《中华中医药杂志》青年编委,《中国组织工程研究》杂志审稿人。主持和参与国家及省市科研课题10余项,获发明专利2项,发表核心论文30余篇,其中SCI收录5篇。
研究方向:(1)中医药联合干细胞修复骨关节软骨损伤,构建组织工程软骨组织;(2)中医药治疗骨与关节疾患;(3)中医药外用剂型的改良研究;(4)中医正骨器械的改良研究。
擅长中西医结合微创治疗膝关节半月板损伤、骨关节炎、前后交叉韧带损伤、肩周炎、肩袖损伤、肩峰撞击综合征、SLAP损伤、跌打损伤、肢体创伤骨折、韧带损伤及颈肩腰腿痛等骨科运动系统疾病及其相关疾病骨科内镜下微创手术治疗,临床和科研经验丰富。
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