血清|《科学》子刊：对化疗耐药的三阴性乳腺癌，这次屈服了！( 二 ) mg|化疗|反应|研究|患者|细胞

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▲ 参与2期试验的TNBC患者报告的毒性反应
研究人员还比较了治疗有反应组和无反应组患者血清中细胞因子的含量，他们采集了20位患者（13例有反应， 7例无反应）在2个化疗周期的第1、2、5天采集的血清样本，随后分别检测了38种细胞因子的含量。
经比较发现，无反应组患者第1个周期GM-CSF浓度升高，第1和2周期中IL-10、IL-1A和IL-6升高。 VEGF、IFN-α2和IL-12p40的浓度在有反应组和无反应组之间也有差异。
紧接着，研究人员试图通过PCA（主成分分析）来探索潜在的预测标志物，结果显示：在第1和2个化疗周期的第5天，无反应组患者的血清细胞因子浓度比有反应组患者有更大的整体变化。热图显示，在第1和2个化疗周期的第5天，无反应组患者的血清中含有较高浓度的FGF-2、VEGF、IL-8、IL-12p40、IL-1a和IL-6。此外，线性混合效应回归分析显示，这些细胞因子浓度与较差的治疗反应相关。

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▲ 2期试验中患者血清细胞因子浓度 A.在第1、2个化疗周期的第1、2、5天对20名患者的血清样本中的38种细胞因子进行检测，有反应组（n=13 ，蓝色）和无反应组（n=7 ，红色）细胞因子浓度的差异 B.对有反应组和无反应组在第1、2个周期的第5天的血清细胞因子进行PCA分析 C.有反应组和无反应组在第1、2个周期的第5天细胞因子浓度热图，数据被标准化为每个细胞因子的z分数。 *P<0.05；**P<0.01 。
在研究的最后，研究人员进一步探索了治疗有反应组和无反应组循环中和肿瘤内免疫细胞群体的变化。
对于循环中的免疫细胞，研究人员在化疗第1天、第17天（第1周期）和第38天（第2周期），分析了2位有反应患者和2位无反应患者的PBMC（外周血单个核细胞）。
结果显示，在化疗后第17天，有反应患者的CD4和CD8 T细胞数量比无反应患者高，而在无反应者中，单核细胞更多的表达典型的标志物（CD123、CD172a、CD58、HLA-DR、NOS2和TNF-α），且这些特征在第2个周期仍然存在（除了CD4 T细胞数量）。 tSNE降维结果显示，在2个化疗周期中，有反应患者的CD8效应记忆T细胞数目增加，而无反应患者的髓系细胞数目增加。

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▲ TNBC患者循环免疫细胞分析 A. 4位患者（2位治疗有反应、2位无反应）在治疗第17天和第38天CD45+的PBMC细胞中免疫细胞群体相对于基线水平的log2倍变化热图 B. 1位有反应患者和1位无反应患者在基线、治疗第17天和第38天的tSNE图
对于肿瘤内的免疫细胞的变化，研究人员对6位患者（3位治疗有反应、3位无反应）的乳腺肿瘤组织进行了质谱成像分析，研究显示，在化疗结束时，无反应患者的肿瘤组织中M2型巨噬细胞浸润增加，而有反应患者的肿瘤组织中CD15+粒细胞增加。
总的来说，这个1/2期临床试验结果表明， NOS抑制剂联合紫杉醇可在TNBC中重塑肿瘤微环境中的免疫细胞组成，治疗后肿瘤组织里中性粒细胞数目和巨噬细胞极化的改变可能预示着不同的治疗效果。
此外，这一疗法的总体响应率为45.8% ，对于常规化疗抵抗的局部晚期TNBC响应率高达81.8% ，且安全性较高，这些结果都为今后的3期临床试验奠定了坚实的基础。
参考文献
1.Triple-negative breast cancer: Clinical features and patterns of recurrence. Clinical Cancer Research. 2007