肿瘤|《科学》子刊：T细胞未入肿瘤先“丧胆”，免疫治疗也“一筹莫展” 团队|细胞|Sprange|研究|患者|肿

非小细胞肺癌（NSCLC）是肺癌中最常见的一类。携带EGFR、ALK、ROS1等基因突变的NSCLC患者，临床建议使用对应的靶向药物进行治疗。而携带KRAS突变NSCLC患者，则可采用免疫检查点阻断疗法（ICB）治疗[1-3] 。
从现有的研究来看，ICB的治疗效果跟与KRAS同时存在的其他基因突变有关。比如，同时存在KRAS和LKB1/STK11突变的肿瘤，往往浸润T细胞数量很少，对ICB治疗响应较差[4] 。
让人意外的是，在同时存在KRAS和TP53突变的NSCLC中，虽然有着丰富的T细胞浸润，但ICB的实际治疗响应率却也只有35%左右[3-4] 。这种差异表明，在KRAS/TP53突变的NSCLC中，并非所有的肿瘤浸润T细胞都对ICB有反应，因此需要更好地了解肿瘤反应性T细胞的功能状态。
有研究指出， ICB对NSCLC患者的治疗效果受T细胞激发的PD-L1表达影响[5] 。因为当肿瘤微环境内部分T细胞功能异常，可能就无法产生足够多的IFNγ来刺激PD-L1表达。据统计，在NSCLC患者群体中，肿瘤组织既有丰富T细胞浸润，又是PD-L1表达阳性患者比例恰好将近40%[6] ，很可能就对应ICB疗效好的那类人群。而PD-L1阴性、T细胞浸润的NSCLC患者对ICB的反应很差。
由此研究人员推测，并不是所有T细胞在浸润到肿瘤组织后，都会对ICB治疗敏感，有可能存在一群“摸鱼”的T细胞，不能有效杀灭肿瘤细胞，也无法被ICB重启。
近日，麻省理工大学生物学院的Stefani Sprange团队在 Science immunity 期刊上发表重要研究，就揭开了其中的奥秘[7] 。他们发现：原来ICB治疗效果大打折扣是因为有群异常的T细胞，它们甚至在进入肿瘤之前就发生了基因表达变化而功能紊乱，更无法被ICB重启杀伤肿瘤细胞的能力。

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▲ 论文首页截图
为了搞清楚为什么有些肿瘤浸润T细胞不行， Sprange团队先分别在小鼠的肺原位和皮下种植KP肺癌细胞（KRAS G12D突变和P53缺失）构建了两种体内肺癌模型，再给与相同ICB治疗。结果显示，ICB治疗对皮下瘤有效，而对肺原位瘤疗效甚微。研究人员发现肺部肿瘤内浸润的淋巴细胞远比皮下瘤内的更丰富，也说明 T细胞浸润数量并不是ICB效果的决定因素。
接下来，研究人员将两处肿瘤内的免疫细胞进行单细胞测序，结果发现在皮下瘤内有较多高表达效应T细胞分化和耗竭基因的CD8+ c1 T细胞群；而在肺部肿瘤内则富集到了另外一群 CD8+ c2 T细胞，它们上调有关T细胞存活和归巢类基因的表达，同时还缺乏正常的T细胞耗竭基因表达，提示这类细胞可能处于异常的T细胞功能紊乱状态，因而降低了对ICB的响应。于是 CD8+ c2 T细胞被研究人员列为“首要嫌疑人” ，并命名为——TLdys 。
▲ ICB治疗响应较差的肺原位瘤中TLdys的基因分型
那么这群TLdys到底是哪来的呢？
研究人员又猜想肿瘤微环境可能是TLdys形成的关键因素。于是， Sprange团队先将肺部和皮下瘤的T细胞分选出来，再打到Rag2敲除鼠体内（B和T细胞缺陷），并在数周后向该小鼠再次皮下注射KP细胞。结果发现，注射皮下肿瘤内T细胞依旧比注射TLdys更能延缓体内KP肿瘤的进展，表明 TLdys不会因所处的肿瘤微环境再发生改变，而是在早期就处于一种持续性的功能紊乱状态了。

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研究人员决定继续追寻两种T细胞间的早期差异来源，于是回溯到T细胞进入肿瘤前的定居地：分别是对应肺原位肿瘤的肺纵隔淋巴结（MLN），还有对应皮下肿瘤的腹股沟淋巴结（ILN）。