CD：肺癌为何会对一代又一代的EGFR-TKI耐药？这个研究破案了！ _健康小知识

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全球每年约有220万人罹患肺癌， 180万人死于肺癌[1] ，肺癌严重威胁人类生命健康。 EGFR突变是最常见的肺癌突变类型，尤其在包括中国在内的亚洲地区。
自2002年问世以来，针对EGFR突变的酪氨酸激酶抑制剂（EGFR-TKI），大大延长了肺癌患者的生存时间，已成为EGFR突变肺癌一线治疗的最佳选择。
可是，道高一尺，魔高一丈。 EGFR-TKI应用一段时间后，患者不可避免地出现耐药，成为制约肺癌靶向治疗的一个难点[2] 。为克服耐药， EGFR-TKI不断更新换代， “打补丁”式地进行完善，从以吉非替尼为代表的一代，到以奥希替尼为代表的三代，再到临床试验中的四代，一代更比一代强，然而，耐药依旧层出不穷。
治疗过程中产生新突变，是肺癌获得性耐药的一个重要原因[3] 。如对一代和二代TKI耐药的T790M突变，对三代TKI耐药的C797S突变。但是，其详细机制尚有待阐明。
近日，由以色列魏茨曼科学研究所YosefYarden领衔的研究团队，揭示了肺癌经EGFR-TKI治疗产生耐药突变的机制，相关论文发表于肿瘤学顶级期刊CancerDiscovery上[4] 。
他们发现，肺癌细胞经EGFR-TKI刺激后， AXL被激活。 AXL一方面激活RAD18 ，启动DNA易错旁路修复机制，加速耐药突变的出现；另一方面激活MYC ，调控嘌呤合成，使核苷酸库失衡，增强诱变。如果在EGFR-TKI的治疗中联用抗AXL抗体，能抑制耐药性的产生，防止肺癌复发。

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官网论文首页截图
研究伊始，研究人员使用EGFR-TKI处理肺癌细胞，获得不同程度的耐药亚克隆细胞，对这些细胞进行转录组测序，发现GAS6是持久耐药细胞中最明显的高表达基因。与此同时，来自临床的样本也发现， EGFR-TKI治疗失败的肺癌患者也高表达GAS6 。
既往研究发现， GAS6及其受体AXL在癌症中参与了肿瘤细胞的增殖和转移[5] 。研究人员对AXL在肺癌中的表达进行检测，发现TKI治疗后复发的肺癌小鼠AXL表达升高， AXL磷酸化水平也上调。这提示GAS6-AXL轴可能还参与肺癌的TKI耐药。
为了检验假说，研究人员分别过表达和敲除肺癌细胞的AXL ，然后把细胞暴露于EGFR-TKI 。相比于野生型的肺癌细胞， AXL过表达细胞存活率增加，而AXL敲除细胞存活率降低。
接着，研究人员又在体内对AXL的促耐药作用进行了验证，把AXL过表达肺癌细胞和AXL敲除细胞分别接种于裸鼠，然后用TKI治疗荷瘤小鼠。 AXL过表达的肺癌小鼠更早地出现耐药， AXL敲除的肺癌小鼠则完全没有复发现象。
这些结果表明， GAS6-AXL轴被TKI治疗激活后，促进了肺癌细胞耐药。

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AXL过表达的肺癌小鼠生长加快， AXL敲除的肺癌小鼠肿瘤生长减慢
我们都知道， DNA损伤是对细胞的致命打击，为应对DNA损伤，细胞会启动DNA修复机制。 TLS聚合酶参与DNA损伤修复，直接在损伤的DNA上掺入核苷酸，延续DNA复制。而TKI的作用机制之一即是破坏细胞对DNA损伤的修复能力[6] 。
于是，研究人员检测了TKI治疗后肺癌细胞的DNA损伤和修复情况。
经TKI处理后，肺癌细胞DNA双链断裂，产生ROS ，凋亡增加，存活下降， RAD18和TLS聚合酶等DNA修复相关酶表达上调。而在AXL过表达后，肺癌细胞能抵抗TKI的打击， DNA断裂减少， ROS水平降低，凋亡被抑制，存活率升高， RAD18和TLS聚合酶的表达上调至更高水平。
RAD18是一种E3泛素连接酶，通过诱导PCNA单泛素化和招募TLS聚合酶来激活DNA的易错旁路修复[7] 。易错旁路途径虽然能提高细胞对DNA损伤的耐受性，但却牺牲了复制的保真度，它在损伤的DNA模板对侧掺入错误的核苷酸，引发基因组突变。