T细胞分选激活一步到位 _健康小知识

细胞疗法是近年来医药研发中发展非常迅速的一个领域，它不仅是一种新颖的医疗实践，也是一种特殊的医药产品。尽管近几年细胞治疗产品的细胞来源和种类不断丰富，但针对T细胞进行改造的细胞疗法目前仍是占据整个细胞治疗领域的重要部分。其中， CAR-T疗法是一个结合了免疫疗法、基因疗法和细胞疗法的重量级代表，它作为FDA认证的第二个细胞治疗药物，其制备流程十分复杂，涉及单采采集， T细胞分选、激活，基因修饰，扩增培养，收获冻存等多个步骤。其中尤为关键的工艺环节就不得不提T细胞的分选和激活，这一过程直接关系到后续能否成功制备出高质量的细胞产品。

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CAR-T疗法（图片来源于网络）
T细胞分选与激活
T细胞的有效分选能够减少病毒的用量，提高转导效率，节省成本。此外，有研究显示， T细胞分选直接影响到CAR-T细胞的抗肿瘤活性，是CAR-T终产品质量的保证，并且关系到后续T细胞的激活和扩增。而体外激活T细胞的方法目前市场上主要有：①使用可溶性抗体,如CD3、CD28抗体联合细胞因子(如IL-2等)进行刺激；②将抗体结合在固相载体上,如CD3/CD28抗体偶联磁珠等。有研究表明，使用CD3/CD28抗体磁珠激活T细胞，比用OKT3（抗CD3抗体）激活可保留更多的T细胞记忆表型，激活作用更强，扩增的T细胞耗竭更少，疗效更加持久。
目前针对T细胞的分选及激活主要有两种策略。一是应用纳米级别磁珠先进行CD4/CD8的分选或CD3的分选，而后联合使用纳米级别CD3/CD28激活试剂；二是以微米级别CD3/CD28抗体磁珠对T细胞进行分选及激活。相对而言，微米级别磁珠具有更强的结合能力，更强的激活效果，可将T细胞的分选及激活步骤整合，工艺流程、设备操作相对简便，在临床申报案例中微米级别CD3/CD28磁珠的应用依旧占据多数。
同立海源近期新推出集分选和激活功能于一体，既可高效分选出人T细胞群，还可用以后续T细胞激活扩增的磁珠产品：ActSepTMCD3/CD28分选激活磁珠（Cat.No.GMP-TL603），省时高效，国内首创，应用性能上不逊色于进口主流磁珠产品。

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产品优势
?集分选激活于一体，省时高效
?4.5μm超顺磁珠，与细胞大小匹配
?分选效率高，并可高效激活扩增T细胞
?方便分离，易操作
?高稳定性，高安全性
?产品符合ISO9001和ISO13485质控要求
产品性能
01、高分选效率

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图1：不同比例的细胞/磁珠， CD3+T细胞的分选效率
02、有效激活T细胞

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图2：磁珠刺激不同时间， T细胞激活状态
03、高效扩增T细胞

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图3：不同比例的细胞/磁珠， T细胞的扩增效率

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图4：培养体系中不去除磁珠和Day5时去除磁珠，均能有效扩增T细胞
04、T细胞亚型变化

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图5：培养体系中不去除磁珠和Day5时去除磁珠， CD4和CD8T细胞比例变化
CAR-T免疫细胞疗法在肿瘤治疗等方面的难题上表现出惊人的效果，有着广阔的研究前景。但CAR-T不仅开发成本和制备成本非常高，而且存在一个亟待解决的“卡脖子”问题，那就是关键原材物料长期被国外企业垄断，导致供货时间长、价格昂贵等问题，这些都是限制CAR-T药物开发和生产的重要因素。这次长达近三年的疫情也给我们再一次敲响警钟， “国产替代”势在必行，另一方面也可能成为未来降低成本的重要方向之一。