学术前沿：科学家在三阴性炎性乳腺癌领域取得新进展，可促进靶向治疗方法开发( 二 ) _健康小知识

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04、CCL2在A3250细胞和人IBC中高表达
为了确定可能介导A3250肿瘤髓细胞招募的原因，研究者分析了A3250肿瘤和细胞mRNA-Seq结果中趋化因子的表达。 A3250肿瘤的结果分析显示， 44个趋化因子中10个有表达，其中只有3个（CCL2、CXCL5和CCL20）在肿瘤（体内）和细胞（体外）均高表达，而CCL2的表达量最高。随后，研究者利用OlinkTarget96炎症panel检测了A3250细胞上清中的趋化因子，其中CCL2、CXCL5和CCL20蛋白水平较高。研究者分析了包含41个人类IBC和55个非IBC的VanLaere芯片数据，以及包含25个IBC和57个非IBC的Iwamoto数据。在两个数据集中， IBC的CCL2中位数表达水平均显著高于非IBC 。综上所述，这些数据表明，人类IBC ，如A3250 ，通常表现出较高的CCL2表达水平。

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05、趋化因子受体CCR2在A3250IBC肿瘤模型的髓系细胞高表达
趋化因子CCL2通过CCR2发挥作用， CCR2是主要的趋化因子受体，介导单核细胞和巨噬细胞招募到炎症部位。研究者检测了CCR2在A3250肿瘤、肺和血液的白细胞中的表达情况。结果表明，血液中存在高水平的CCR2+炎症单核细胞和高CCR2表达的髓系细胞与A3250肿瘤和肺转移相关。虽然CCL2在A3250细胞中高表达，但其他激活CCR2的人类趋化因子(CCL7、CCL8、CCL13和CCL16)均未表达。这些发现表明，在A3250肿瘤模型中， CCL2作为关键的CCR2激动剂，并强烈提示CCL2在单核细胞和巨噬细胞招募到A3250原发和转移位点中发挥重要作用。

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06、CCL2敲低显著降低了A3250肿瘤的生长、肺转移和炎症表型
为了研究CCL2在A3250肿瘤恶性表型中的功能，研究者对CCL2进行了shRNA敲低(KD) 。 CCL2敲低可显著抑制肿瘤生长，同时IBC特征的皮肤炎症也显著减少。此外， CCL2敲低降低了肺转移的发生率和总体转移负担。大多数CCL2敲低肿瘤小鼠肺内无大转移，主要表现为弥散性肿瘤细胞，而对照组A3250肿瘤小鼠主要表现为大转移。
CCL2敲低肿瘤免疫细胞的免疫染色显示，肿瘤区域的CD45+细胞显著减少，其中大部分是F4/80+巨噬细胞。肿瘤中CCL2的下调可减少巨噬细胞浸润和全身炎症。

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07、人IBC存在巨噬细胞的富集
最近的一项研究发现了基于不同免疫浸润的不同人类TNBC（三阴性乳腺癌）亚型，从巨噬细胞富集到中性粒细胞富集。为了检验人类IBC是否富含巨噬细胞，研究者分析了41个人类IBC和55个非IBC的芯片数据。分层聚类显示了两类乳腺癌，分别为富集或不富集TAM（肿瘤相关巨噬细胞）基因。富集TAM基因的IBC样本明显多于未富集TAM基因的IBC样本。免疫染色检测巨噬细胞(CD68+)和中性粒细胞(CD66b+)显示，高密度巨噬细胞出现在间质和/或肿瘤细胞簇内。该结果与基因表达分析表明人IBC存在巨噬细胞富集，也与研究者对A3250肿瘤的研究结果一致，进一步强调了A3250肿瘤模型与人IBC的相关性。

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研究总结
本研究围绕一个来源于三阴性炎性乳腺癌（IBC）的细胞系A3250进行了研究。 A3250细胞及移植瘤模型显示了人IBC关键的临床和组织病理学特征。对A3250细胞和肿瘤的转录组RNA测序发现了显著的炎性特征，结合OlinkTarget96炎症panel找到了一个在A3250细胞和肿瘤中高表达的趋化因子CCL2 ，该趋化因子在IBC的原发和转移位点发挥关键作用。敲低CCL2可有效改善移植瘤小鼠的疾病特征。此外，研究者发现，在巨噬细胞是临床IBC中的一个主导亚群，这意味着耗尽或靶向巨噬细胞的免疫治疗策略可能是很有前途的IBC治疗方法。总体，本研究的结果表明，基于A3250细胞的IBC肿瘤模型将帮助人类进一步了解IBC生物学，并有助于促进IBC靶向治疗方法的开发。（来源吉凯基因）返回搜狐，查看更多