名称性质应用清除测试原理实验步骤 dpph自由基是什么 _经验分享

文章插图

基本信息编辑
中文名
1,1-二苯基-2-三硝基苯肼
外文名
1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl
别名
1,1-二苯基-2-苦肼基
化学式
C18H12N5O6
熔点
（m.p.)127～129度（分解）
水溶性
难溶于水，易溶于有机溶剂
分子式
C18H12N5O6
分子量
394.32
外观
暗紫色大棱柱形晶体
应用
阻聚剂，自由基捕获剂
CAS号
1898-66-4
注意
见光易分解，宜于0℃左右闭光保存
DPPH编辑
用于光度测定生育酚等的化合物
1,1-二苯基-2-三硝基苯肼，别名1,1-二苯基-2-苦肼基（自由基）；1,2-二苦基-2-三硝基苯亚肼；1,2-二苯基-2-苦肼基。是一个稳定的自由基，为暗紫色棱柱状结晶，熔点127～129℃（分解）。最大吸收波长528nm 。可用于光度测定生育酚和脂肪族硫醇类、还原物质的分析试剂，也是常用的阻聚剂。
本品应密封于0℃保存。
目录
1名称2性质应用3清除测试
原理实验步骤清除测试的缺陷
名称
编辑
1，1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl radical 2,2-Diphenyl-1-(2,4,6-trinitrophenyl)hydrazyl )
暗紫色大棱柱形晶体。一般试剂含量不小于98% 。
该品具有刺激性。吸入、口服或皮肤接触有害。大量使用应穿适当的防护服和戴手套。
DPPH有两个主要的应用，都用于实验室研究中：一是在含有自由基的化学反应中作为一种监测反应的物质，典型的用于抗氧化成分的体外抗氧化性评价；还可以作为电子顺磁共振信号位置和强度的标准物质。
性质应用
编辑
DPPH具有几个不同结晶形态，它们的晶格对称性和熔点（m.p.）存在差异。商品化的粉末是不同晶相的混合物，熔点在130℃附近。DPPH-Ⅰ（m.p. 106℃）是正交晶系，DPPH-Ⅱ(m.p. 137℃)是无定形态，DPPH-Ⅲ（m.p. 128-129℃）是三斜晶系。
DPPH是一种很稳定的氮中心的自由基，它的稳定性主要来自3个苯环的共振稳定作用及空间障碍，使夹在中间的氮原子上不成对的电子不能发挥其应有的电子成对作用。作为一种稳定的自由基，DPPH可以捕获（“清除”）其他的自由基。因此通过加入DPPH后观察某一化学反应的速率是否减慢，来作为这一反应是否具有自由基反应本质的指标。由于DPPH自由基在以300~400之间为中心处具有强烈的吸收，因此在溶液中呈现深紫色，并且在被中和之后会变为无色或浅黄色。利用这一特性可以直观地检测反应的过程，通过记录DPPH在在520nm吸光度值或者EPR信号的变化可以得到初始自由基的量。

文章插图

DPPH
由于DPPH是十分有效的自由基捕获剂，因此它在自由基调控的聚合反应中是一种很强的抑制剂（阻聚剂）。

文章插图

DPPH
作为一种稳定和良好定性的固体自由基的来源，DPPH可能是最为广泛使用的电子顺磁共振信号位置（g-marker）和强度的标准物质—-通过称量可以确定新鲜配置的样品自由基的数目，DPPH的EPR分裂因子校正在g=2.0036 。DPPH的信号一般聚合为单一的线，在更宽的功率范围内，信号强度与微波功率的平方根呈线性关系，因此用DPPH作为校正的标准物质十分方便。DPPH的稀释特性（每41个原子含一个不成对自旋）导致它具有一个相对小的线宽(1.5–4.7Gauss) 。但是若溶剂分子保持在结晶状态并且在高频率的EPR设定下测定，线宽可能会增加。
清除测试
编辑
原理
DPPH法于1958年被提出，广泛用于定量测定生物试样和食品的抗氧化能力。此法是根据DPPH自由基有单电子，在517nm处有一强吸收，其醇溶液呈紫色的特性。当有自由基清除剂存在时，由于与其单电子配对而使其吸收逐渐消失，其褪色程度与其接受的电子数量成定量关系，因而可用分光光度计进行快速的定量分析。
实验步骤
1.用无水乙醇配置 0.1mmol/L 的DPPH溶液，避光保存。配置 0.5mg/mL 的Vc溶液（作为对照）。将测试样品稀释至不同浓度。
2.将2mL测试样品溶液及 2mL DPPH 溶液加入到同一试管中，摇匀，室温下暗处静置 30min 后测定其吸光度A sample,同时测定 2mL DPPH溶液与 2mL 溶剂（蒸馏水或者相应的缓冲溶液）混合后的吸光度 A control,以及2mL测试样品溶液与2mL无水乙醇混合后的吸光度A blank 。
3.自由基清除能力的表示：

文章插图

DPPH
清除率越大表明抗氧化能力越强。为了更直观的表明样品的抗氧化能力，一般选用其他常见的抗氧化剂作为对照，比如Vc 。可以通过绘制Vc浓度与清除率之间的工作曲线，用Vc当量浓度表示样品的清除自由基的能力。
清除测试的缺陷
【名称性质应用清除测试原理实验步骤 dpph自由基是什么】由于DPPH是脂溶性的，因而与细胞的水性环境不匹配。现已提出了其替代法，即PTIO自由基清除法。该法可以在水溶液（或pH7.4缓冲溶液）中进行，具有较好的生物相关性。