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1、目的基因片段的获?。耗康幕虻淖槌桑阂桓瞿茏挤氲慕峁够蛴Πㄗ计舳⒑颂翘迨侗鹎⒈嗦肭⒑妥贾罩骨?。
2、获得途径:1限制性内切酶酶切法2利用PCR技术直接扩增目的基因3目的基因的化学合成4通过构建基因组文库或CDNA文库分离目的基因5反向转录法分离目的基因目的基因导入受体细胞:原核生物最理想受体细胞:大肠杆菌、枯草杆菌、蓝藻、棒状杆菌 。
3、真核生物应用最广的受体细胞:酵母细胞途径:1电穿孔法2基因枪法3激光微束穿孔法4显微注射法5多聚物介导法6脂质体介导转化法克隆子的筛选鉴定:克隆子的筛选方法:1根据载体选择标记基因2根据报告基因 3根据PCR扩增片段4根据限制性核酸内切酶图谱分析5采用DNA杂交法6应用DNA芯片7DNA核苷酸序列测定 。
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