血清知识大盘点( 二 )


10马血清
10%马血清可代替FBS用于支持SRBC的体外抗体应答,常与牛血清结合或单独作为哺乳动物细胞培养的补充培养基 。
11猪血清
猪血清在染色体研究中表现非常出色 , 可用于淋巴细胞培养,疫苗生产(生产支原体),中和脂质体包裹的腺相关病毒(AAV),用于诱导大鼠肝纤维化,作为酶联免疫吸附试验(ELISA)中的标准阴性参考 。
12兔血清
正常兔血清可作为免疫分析的阻断剂和对照 。 在免疫组织化学和免疫细胞化学方面 , 各种研究均采用20%或1:200稀释兔血清作为阻断剂 。
13羊血清用于生物医学研究的大多数细胞系和原代培养物上 , FBS的合适替代物 , 病毒分离和鉴定 , 病毒学研究 。 用作鱼类细胞培养的有效NBCS替代物 。 可成功地代替胎牛血清在生长培养基中长期用于环孢蘑菇的体外繁殖 。
胎牛血清成分已知的已有上千多种 , 以下为主要成分表:
成分
浓度
成分
浓度
蛋白和多肽
血清知识大盘点】-磷脂
0.7-3.0mg/ml
白蛋白
20-50mg/ml
丙酮酸
2-10ug/ml
胎球蛋白
10-20mg/ml
碳水化合物
-纤连蛋白
1-10ug/ml
葡萄糖
0.6-1.2mg/ml
球蛋白
1-15mg/ml
乳酸
0.5-2.0mg/ml
α-抗胰蛋白酶
0.5-2.5mg/ml
多胺
转铁蛋白
2-4mg/ml
丁二胺,亚精胺
0.1-1.0uM
生长因子
-
尿素
170-300ug/ml
EGF,PDGF,IGF-I,IL-1
1-100ng/ml
无机物
-氨基酸
0.01-1.0uM钙 , 氯化物 , 钾 , 磷
-脂质
-
激素
-胆固醇
10uM
胰岛素
1-100ng/ml
脂肪酸
0.1-1.0uM
皮质醇
10-200nM
亚油酸
0.01-0.1uM
维生素
10ng-10ug/ml
各位老师可以根据自己的实验需求选择不同的血清 。
★我们同时为您收集了一些使用血清时的典型问题:
01
血清的颜色如何?
为何有的胎牛血清颜色偏红 , 而有的偏黄?是因为胎牛血清颜色是由血红蛋白(鲜红)和胆红素(黄)决定的 , 主要是受血红蛋白影响 。 血红蛋白含量很低时 , 含少量胆红素 , 呈淡黄或金黄 。 血红蛋白含量高时 , 会呈现淡红色 。
需要长期保存的血清必须储存于-20℃冰箱(未开封血清有效期为5年) 。 若存放于4℃ , 请勿超过1个月 , 若一次无法用完一瓶 , 建议将血清无菌分装并冷冻 。
02
血清如何解冻 , 使用前是否需要过滤?
血清解冻需采用逐步解冻法:将血清从-20℃冰箱放入4℃冰箱中溶解一天 , 然后移入室温 , 待全部溶解后再分装 。 在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(小心勿造成气泡) , 减少沉淀生成 。 切勿直接将血清从-20℃转入37℃解冻 , 这样因温差较大易造成蛋白质凝结并出现沉淀 。
本公司血清在ISO13485认证的厂房中生产 , 经过3次0.1μm过滤 , 出厂经过检测并且会使用三种以上的细胞株进行培养测试及无菌检测 , 污染几率非常非常非常(重要的事情说三遍)低 。 通常细胞污染有非常多的可能性 , 根据协助使用者进行分析检测 , 结果表明绝大部分都是因人为操作失误导致污染 。 因此买来的血清不需要再次进行过滤 。
下图为人肉眼和光学显微镜所能观察到的微粒大小 。 由于我们的血清是经过3次0.1μm过滤 , 因此若肉眼可以观察到异物时 , 可以考虑:是否血清溶解后蛋白质凝集是否操作时导入污染物
血清知识大盘点
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03
为什么血清中会有沉淀生成 , 主要成分是什么 , 会对实验有什么影响?