同样 ， 氰基处的羟基化为酰胺和羧酸代谢物在成熟叶片中也表现出最高的M/P比 ， 分别约为2.1%和0.6% 。 花朵中仅存在微量的IN-JCZ38 ， 而这些羟基化代谢物在任何发育阶段的果实中均未检测到 。

总的来说 ， 从这项研究中获得的结果表明 ， 氰虫酰胺对植物代谢相对顽固 。 在实验过程中 ， 氰虫酰胺是不同组织中的主要残留物 ， 直至果实成熟 。 生物转化过程主要发生在地上生物质中 ， 特别是在成熟叶中 。
氰虫酰胺→IN-J9Z38→IN-MLA84→TP619是氰虫酰胺在番茄植株中的主要转化途径 ， 从它们在处理后不同时间普遍存在于叶子、花和果实中可见 。 此外 ， 番茄植株中氰虫酰胺的生物转化也与几种代谢物有关 ， 包括低丰度的I期 ， II期和其他分解产物 。 据我们所知 ， 这项研究首次捕捉到了二酰胺杀虫剂在作物植物生命周期中的代谢命运 。
植物生长和杀虫剂应用番茄植株在发芽后约四周通过土壤浸泡用氰虫酰胺处理一次 ， 使用温室种植植物推荐的低施用率 。 处理组的每个锅接受470mL稀释溶液 。 对照组接受相同量的水 。 每组由40株植物组成 ， 这些植物在温室长凳上以完全随机的设计排列 。

每天晚上在早晨采样之前 ， 植物都要浇水 ， 以增加根系压力 。 日出后一到三个小时 ， 用锋利的剃刀将植物放在土壤表面以上约7厘米处 ， 以产生平坦的树桩表面 ， 木质部汁液在上面积聚成液滴 。 为了尽量减少污染 ， 丢弃在除顶的前2分钟内积累的液滴 ， 并用去离子水洗涤残肢并用纸巾轻轻吸干 。 在接下来的 20 分钟内 ， 将汁液频繁移液到保存在冰上的 2.0 mL 离心管中 。 然后将试管储存在-80°C直至分析 。

氰虫酰胺定量和代谢物筛选氰虫酰胺的回收率和潜在的植物基质干扰通过内标d的比例测定最终提取物中的氰虫酰胺浓度与每个样品中的标称加标浓度 。 我们的初步试验表明 ， 传统的QuEChERS基质去除程序导致一些氰虫酰胺代谢物的显著损失 。 因此 ， 在本研究中 ， 仅使用C18吸附剂部分去除基质以基本保留代谢物库 。

结论如前所述进行氰虫酰胺代谢物的筛选简而言之 ， MS1扫描数据由化合物发现者软件使用定制设计的工作流程进行处理 ， 未处理样品中存在的m / z信号从氰虫酰胺代谢物筛选中消除 。 假设代谢物含有至少一个来自母体氰虫酰胺的Cl和/或Br原子 ， 则通过Cl / Br同位素过滤器进一步处理候选代谢物 。

随后 ， 使用化合物发现者鉴定的代谢物的准确m / z和相应的MS将其与编译的代谢物列表进行搜索碎片离子 。 其余代谢物被注释为新鉴定的转化产物 。 由于缺乏参考标准品 ， 初步确定的代谢物的相对定量 。 并提供了定量水平的氰虫酰胺和代谢物的色谱图 。

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